IPSC实验
更新时间：2025-10-29
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包被液有哪些？
Vitronectin
玻连蛋白是血清和组织中的关键细胞粘附因子，通过与糖胺聚糖和蛋白聚糖结合，在细胞相互作用中发挥着至关重要的作用。它被特定的整合素识别并作为重要的粘附分子，促进细胞-基质相互作用。
Matrigel
是一种从小鼠肉瘤中提取的、可溶的基底膜基质。在室温或体温下，它能从液态凝固成凝胶状，为细胞生长提供一个模拟体内真实环境的三维支架。
要准备的试剂
iPSC培养基
ROCK抑制剂
EDTA溶液
DPBS
IPSC复苏
预热平板：提前1h取出包被好的平板，室温平衡
快速化冻：取出细胞冻存管置于37℃水浴锅摇晃化冻
离心重悬：将细胞转移至含培养基的离心管中
ROCKi是救星：离心弃上清，用含ROCKi的iPSC完培重悬细胞
均匀接种：弃掉包被液，接种细胞，十字摇晃平板混匀细胞
IPSC传代
第一次换液：复苏后24h将孔内培养液更换为不含ROCKi的完培
看准时机：此后每天换液，直至细胞汇合度长至80-90%可进行传代
预热平板：提前1h取出包被好的平板，室温平衡
消化要轻柔：将传代细胞的孔内培养液弃掉，加入DPBS轻柔润洗一遍后弃掉，加入EDTA溶液，放回培养箱中进行消化，消化结束后弃掉EDTA，加入完培终止消化
均匀接种：取一定量细胞进行细胞接种
