重组人血管内皮生长因子（rhVEGF165）产品技术手册

1. 产品概述 (Product Overview)

重组人血管内皮生长因子（Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor, rhVEGF） 是一种同源二聚体糖蛋白，属于血小板衍生生长因子（PDGF）家族。在人体内，VEGF有多个亚型（如VEGF121, VEGF165, VEGF189等），其中VEGF165 是生物活性强、组织中表达丰富且科研应用广泛的亚型。

本产品利用基因重组技术（ E. coli ）制备，通过多步层析纯化工艺获得。它能特异性地结合血管内皮细胞表面的受体，是血管生成（Angiogenesis）和血管发生（Vasculogenesis）过程中最关键的调节因子。我们提供的rhVEGF具有高纯度、高比活性和低内毒素的特点，是细胞培养、组织工程及药物研发领域的理想试剂。

2. 作用机理 (Mechanism of Action)

rhVEGF165 作为一种强效的有丝分裂原，其生物学效应主要通过以下机制实现：

1. 受体特异性结合： rhVEGF165 能高亲和力地结合两种酪氨酸激酶受体——VEGFR-1 (Flt-1) 和 VEGFR-2 (KDR/Flk-1)。其中，VEGFR-2 是介导内皮细胞增殖和血管生成信号的主要受体。

2. 信号通路激活： 结合受体后，诱导受体二聚化及自身磷酸化，激活下游的 PLCγ-PKC-MAPK 等信号通路。

3. 生物学功能执行：

• 促进增殖与迁移： 显著促进血管内皮细胞的分裂、增殖，并诱导其向血管生成区域迁移。

• 增加血管通透性： 它是已知的血管通透性诱导剂之一，有助于血浆蛋白外渗，为新生血管构建基质。

• 抗凋亡作用： 诱导抗凋亡蛋白（如Bcl-2）的表达，维持新生血管网的存活。

3. 产品核心优势 (Key Features)

• 生物活性： 每一批次产品均经过人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖实验验证。ED50通常在 1-5 ng/mL 范围内，比活性（Specific Activity）≥ 2.0 × 10^5 IU/mg，确保实验数据的高灵敏度。

• 高纯度级别： 经SDS-PAGE电泳检测，纯度（Purity）> 95%（甚至高达98%），极大降低了杂蛋白对敏感细胞实验的干扰。

• 极低内毒素： 采用去内毒素工艺，内毒素水平 < 0.1 EU/μg（LAL法），满足干细胞诱导、类器官培养及体内注射实验的严苛要求。

• 批次稳定性： 严格遵循质量管理体系，批次间差异（Lot-to-Lot Variation）控制在5%以内，确保您长周期实验数据的一致性。

4. 广泛的应用领域 (Applications)

A. 基础细胞生物学研究

• 内皮细胞培养： 作为HUVEC或其他血管内皮细胞无血清培养基中的必需添加剂，维持细胞状态与增殖。

• 血管生成模型： 用于体外“管腔形成实验（Tube Formation Assay）"或体内“鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验"，研究血管新生的分子机制。

B. 干细胞与再生医学

• 定向诱导分化： 诱导胚胎干细胞（ESCs）或诱导多能干细胞（iPSCs）向内皮细胞谱系分化。

• 组织工程： 在构建人工皮肤、骨修复材料或心肌补片时，添加rhVEGF以促进移植物内部的血管网络构建，解决组织工程中的“供血瓶颈"问题。

C. 类器官（Organoids）构建

• 在肾脏类器官、肝脏类器官或肿瘤类器官的培养体系中，VEGF是构建血管化类器官（Vascularized Organoids）的关键因子，有助于模拟更真实的体内微环境。

D. 药物筛选与肿瘤研究

• 靶点研究： 肿瘤细胞常高表达VEGF以获取养分。rhVEGF可作为阳性对照，用于筛选抗血管生成药物（如贝伐珠单抗类似物）或研究肿瘤微环境。