巨核细胞是骨髓中负责生成血小板的大型多倍体细胞，其成熟过程涉及复杂的形态重塑、DNA复制(内复制)及前血小板延伸。近年来，越来越多的研究表明，线粒体不仅是能量工厂，更在巨核细胞分化与功能调控中扮演关键角色。在巨核细胞早期发育阶段，线粒体数量较少且呈碎片化状态，主要依赖糖酵解供能。随着细胞进入成熟期，特别是启动内复制和细胞质扩增时，对ATP的需求显著上升，线粒体随之发生融合、网络化，并增强氧化磷酸化(OXPHOS)活性。研究表明，线粒体膜电位的维持与巨核细胞多倍体化程度正相关；...

单细胞样品制备样品制备如果研究对象是体外培养的悬浮细胞，则直接收集细胞于离心管中，离心沉淀细胞，然后PBS清洗重悬沉淀，取适量于EP管中，标记染色相应的荧光素偶联抗体，最后洗去未结合的抗体，用适宜体积PBS重悬细胞进行上样；如果培养的细胞是贴壁细胞，需用胰酶消化细胞适当时间后，用培养基或PBS吹打，收集待测细胞，之后同上处理上样检测；荧光标记荧光信号是流式细胞仪接受处理的主要信号；流式细胞仪接收到的荧光信号主要来源于结合在样品细胞上的荧光素；荧光素偶联抗体/染料与细胞结合后就...

一、流式图流式细胞仪分析细胞都是高速的，目前分析速度基本都能达到每秒上万个细胞，每个分析的细胞都能得到几方面的信息，最基本的有FSC、SSC信号，如果再标记荧光素偶联抗体，就会再增加多个荧光信号。为了全面直观反映大量信息，就得采用流式图来显示。流式图有很多种，常用的是流式直方图和散点图，当然还有等高线图等等。流式直方图只能显示一个通道的信息，散点图能显示两个通道的信息，相关分析软件中甚至有能显示三通道信息的3D图。流式直方图流式直方图形成的原理与统计学中直方图相似。其x轴表示...

重组人白介素-11是一种通过基因重组技术制备的促血小板生长因子类药物，主要用于预防和治疗化疗引起的血小板减少症，其作用机制、适用人群、用法用量及不良反应如下：一、作用机制重组人白介素-11通过激活JAK-STAT信号通路，直接刺激骨髓造血干细胞和巨核祖细胞的增殖，诱导巨核细胞成熟分化，促进血小板生成并释放到外周血中，从而提升血小板计数。该药物未改变血小板功能，仅增加其数量。二、适用人群实体瘤及非髓性白血病患者：化疗后出现Ⅲ、Ⅳ度血小板减少症(血小板计数极低)时使用。骨髓移植后...

随着年龄增长，造血干细胞(HSC)功能发生显著退化，表现为自我更新能力下降、髓系偏倚增强、淋巴系输出减少，导致老年人易患贫血、感染及血液肿瘤。机制研究表明，衰老HSC积累DNA损伤、线粒体功能紊乱、表观遗传失调及微环境(niche)信号异常。关键变化包括：干性标志物下调：如CD150⁺CD48⁻比例升高，但功能减弱；ROS水平升高：氧化应激损伤蛋白质与脂质；炎症因子累积：TNF-α、IL-6等促炎信号抑制HSC静息态。针对上述机制，年轻化干预策略不断涌现：代谢重编程：使用NA...

一、流式检测的原理•特定波长的激光束照射到液流内的细胞，产生的光信号被多个接收器接收，通过计算机分析软件量化这些信号。•根据接收到信号的强弱波动来反映出每个细胞的物理化学特征。二、流式细胞术光信号•这些光信号大体可以分为两类：一类是散射光信号，另一类是荧光信号；其中散射光信号又分成2类：•一类是在激光直线方向上接受到的散射光信号（前向角散射FSC，forwardscatter：表示细胞大小）•另一类是垂直方向上接收到的散射光信号（侧向角散射SSC，sidescatter：表示...

类器官技术为模拟人体组织微环境提供了革命性平台，而将造血干细胞(HSC)与血管/骨髓类器官共培养，有望构建“人造骨髓niche”，用于研究造血调控、药物毒性或疾病建模。然而，传统HSC培养基多针对单层悬浮培养设计，难以满足类器官三维结构对营养扩散、信号梯度与基质互作的复杂需求。研究发现，标准HSC培养基(含SCF、TPO、FLT3L)在类器官共培养中存在三大不适配问题：渗透性差：高浓度细胞因子在Matrigel或水凝胶中扩散受限，导致HSC分布不均；信号冲突：类器官分泌的Wn...

原理聚丙烯酰胺凝胶电泳（Polyacrylamidegelelectrophoresis，PAGE），是以聚丙烯酰胺凝胶为支持介质的一种常用电泳技术。SDS（十二烷基硫酸钠）是阴离子表面活性剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，从而破坏蛋白分子间的二、三级结构。而强还原剂如β-巯基乙醇，二硫苏糖醇（DTT）均能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白-SDS胶束，...

包被液有哪些？Vitronectin玻连蛋白是血清和组织中的关键细胞粘附因子，通过与糖胺聚糖和蛋白聚糖结合，在细胞相互作用中发挥着至关重要的作用。它被特定的整合素识别并作为重要的粘附分子，促进细胞-基质相互作用。Matrigel是一种从小鼠肉瘤中提取的、可溶的基底膜基质。在室温或体温下，它能从液态凝固成凝胶状，为细胞生长提供一个模拟体内真实环境的三维支架。要准备的试剂iPSC培养基ROCK抑制剂EDTA溶液DPBSIPSC复苏预热平板：提前1h取出包被好的平板，室温平衡快速化...

SDS是一种阴离子去垢剂，在生物化学和分子生物学领域用途广泛。SDS的用途：蛋白质变性剂：SDS能够断裂蛋白质分子内和分子间的氢键，使蛋白质去折叠，破坏其二、三级结构。在SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)中，SDS与蛋白质结合，使所有蛋白质带上负电荷，且电荷量远超原有电荷，从而消除不同分子间的电荷差异和结构差异，使蛋白质按分子量大小分离。核酸提取：SDS可以裂解细胞膜，释放细胞内的核酸，同时使与核酸结合的蛋白质变性，从而实现核酸与蛋白质的分离。在DNA提取过程中，SDS能...

造血干细胞的体外扩增是细胞治疗、基因疗法和造血重建的关键环节。传统含血清培养体系存在批次不稳定、免疫原性风险和病原体污染隐患，因此，无血清造血干细胞培养基已成为临床级HSC生产的发展方向。在无血清体系中，细胞因子作为调控HSC命运的核心信号分子，其组合与浓度配比的优化至关重要。HSC的自我更新、增殖与分化受多种细胞因子协同调控。目前广泛使用的细胞因子包括干细胞因子(SCF)、血小板生成素(TPO)、FMS样酪氨酸激酶3配体(FLT3-L)和白细胞介素-6(IL-6)等。其中，...

干细胞因其具有自我更新和多向分化潜能，在再生医学、疾病模型构建和药物筛选等领域展现出巨大应用前景。然而，维持干细胞的未分化状态或引导其定向分化，高度依赖于其所处的微环境，其中干细胞培养基中的生长因子扮演着至关重要的调控角色。生长因子是一类具有生物活性的蛋白质或多肽，通过与干细胞表面特异性受体结合，激活细胞内复杂的信号通路，从而精确调控细胞的命运决定。在干细胞培养基中，不同生长因子发挥着独特而协同的作用。例如，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是维持人胚胎干细胞(hESCs)和...