MK培养基储存稳定性与活性保持策略
更新时间：2025-12-19
浏览次数：158
MK培养基(巨核细胞专用培养基)通常含有多种蛋白质类生长因子(如TPO、SCF)、维生素、脂质及缓冲体系，其生物活性易受温度、光照、氧化及微生物污染影响。如何在储存过程中较大限度保持其功能稳定性，是实验室与产业化应用中的关键问题。
主要降解机制包括：
蛋白质变性：TPO等细胞因子在4℃长期存放易聚集失活；反复冻融加速构象改变。
氧化损伤：培养基中不饱和脂肪酸和还原性物质(如谷胱甘肽)易被氧化，产生自由基损害因子活性。
pH漂移：碳酸氢盐缓冲体系在开盖后易受空气中CO₂影响，导致pH升高，影响细胞生长。
活性保持策略如下：
分装冷冻保存：将基础培养基与生长因子分开配制，因子溶液以小体积分装(单次用量)，–80℃避光保存，避免反复冻融。
添加稳定剂：如0.1%BSA可减少蛋白吸附损失；抗氧化剂(如抗坏血酸、N-乙酰半胱氨酸)可延缓氧化。
惰性气体保护：充氮气密封可显著延长液态培养基保质期。
即用即配原则：商业干粉培养基按需溶解，液体培养基开封后4℃保存不超过7天。
活性监测：定期用标准细胞系(如UT-7/TPO)测试培养基支持增殖能力，建立内部质控标准。
在GMP级血小板生产中，还需对培养基进行无菌过滤、内毒素检测及批次一致性验证。未来，开发冻干型MK培养基或微胶囊缓释系统，有望从根本上解决储存稳定性难题，推动体外血小板制造走向临床应用。
