（实验服务）外周血单核细胞分离（PBMC）详情

1. 服务背景与概述

外周血单核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC）是指血液中具有单个核的细胞群体，主要包括淋巴细胞（T细胞、B细胞、NK细胞）和单核细胞。PBMC是人体免疫系统的核心组成部分，是开展免疫学研究、疫苗评价、肿瘤免疫治疗（如CAR-T、CAR-NK研发）以及药物毒理学筛选的基础实验模型。

（实验服务）外周血单核细胞分离（PBMC）依托正规的医疗合作资源及细胞实验室，我们能够为科研机构和药企提供从标准化分离、到精准分选的一站式解决方案。

2. 技术原理与方法

我们主要采用密度梯度离心法（Density Gradient Centrifugation），使用Ficoll-Paque等专业分离液进行制备：

• 分离原理： 利用血液中各成分比重的差异。在离心力作用下，红细胞和多形核白细胞（粒细胞）由于比重较大（>1.077 g/mL）会沉淀至底层；血浆比重最小位于上层；而PBMC的比重介于两者之间（约1.077 g/mL），从而在分离液界面形成一层白色的薄层（即“白膜层"）。

• 工艺流程：

1. 样本采集： 使用抗凝管（通常为肝素钠或EDTA）采集全血或通过单采血浆术获取白细胞层（Leukopak）。

2. 稀释与铺层： 将血液用PBS平衡盐溶液稀释后，小心平铺于等体积的分离液之上。

3. 梯度离心： 采用低速水平转子离心，确保界面层不受扰动。

4. 细胞洗涤： 吸取白膜层细胞，经过两次以上的洗涤去除残留的分离液和血小板。

5. 计数与保存： 进行细胞计数及活性分析，根据需求进行新鲜交付或程序降温冷冻。

3. 严格的样本合规性与质量控制（QC）

样本的合规性与质量是科研数据的生命线：

• 多维度质控标准：

• 细胞活性： 采用AO/PI双荧光染色法检测，确保新鲜样本活性 > 95%，冷冻样本复苏活性 > 90%。

• 细胞纯度： 通过流式细胞术检测CD45+比例，确保淋巴细胞和单核细胞比例符合标准，红细胞残留极低。

• 无菌检测： 确保无细菌、真菌、支原体及内毒素污染。

• 批次一致性： 严格的标准化操作程序（SOP），降低不同操作批次间的差异。

4. 服务类型与定制化选项

• 标准分离服务： 提供健康供体的新鲜或冷冻PBMC。

• 大规模Leukopak加工： 提供单袋细胞数可达数十亿级的PBMC，适合高通量筛选。

• HLA分型服务： 提供针对A/B/C/DRB1等位基因的高分辨率分型信息，满足精准免疫学研究。

• 免疫亚群进一步分选： 在PBMC基础上，利用免疫磁珠法（MACS）或流式分选法（FACS）进一步提供纯化的CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、CD14+ 单核细胞或CD56+ NK细胞。

5. 主要应用场景

• 免疫功能监测： 如ELISPOT、胞内细胞因子染色（ICS）、T细胞增殖实验。

• 药物开发： 抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）、细胞因子风暴评估（CRA）。

• 细胞治疗研发： 作为CAR-T、CAR-NK等免疫细胞治疗产品的起始原料进行基因转导与扩增实验。

• 疫苗研究： 评估疫苗诱导的细胞免疫应答水平。

6. 服务优势

1. 资源丰富： 拥有长期稳定的健康供体库，可根据需求定制特定筛选标准。

2. 专业可靠： 技术团队拥有数千例样本处理经验，尤其擅长处理临床复杂样本。

3. 交付迅速： 全国主要城市支持冷链快运，确保细胞活性状态抵达实验室。

4. 透明化报告： 随货提供详细的质检报告（COA），包含细胞计数、活性图谱及传染病检测结果。

我们的目标是为您提供最纯净、活力高的免疫细胞，为您的科学发现保驾护航。