（实验服务）脐静脉内皮细胞分离（HUVEC）

人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC）来源于新生儿脐带静脉，是目前血管生物学研究中应用广泛、数据积累丰富的体外细胞模型。作为一种典型的大血管内皮细胞，HUVEC在形态、功能及基因表达上高度保留了体内血管内皮的生理特性。

（实验服务）脐静脉内皮细胞分离（HUVEC）依托标准化的细胞培养平台，提供高质量的原代HUVEC分离与定制服务。不同于永生化的细胞系（Cell Line），我们的原代HUVEC直接从健康产妇捐赠的新鲜脐带中分离获得，未经过病毒转化，能够真实反映人体血管内皮在炎症反应、血管生成、凝血机制及屏障功能等方面的生理状态。我们致力于为客户提供纯度高、活性好、背景清晰的“黄金标准"细胞模型。

2. 技术原理与制备工艺

我们采用经典的胶原酶灌注消化法（Collagenase Perfusion Method），并在传统工艺基础上进行了优化，以确保细胞的高得率与低损伤：

1. 样本采集与预处理：与三甲医院紧密合作，采集健康足月剖宫产的脐带（排除乙肝、梅毒、艾滋等传染病）。样本采集后立即置于含抗生素的冷藏保存液中运输，确保在产后6-12小时内开始分离。

2. 插管与冲洗：在无菌超净台内，寻找脐静脉开口，插入钝头针头并结扎固定。使用温热的PBS缓冲液反复冲洗血管腔，直至流出液澄清，去除残留血液和血凝块。

3. 酶消化：注入特定浓度的I型胶原酶（Collagenase Type I）溶液，充满血管腔。在37°C环境下孵育适量时间（通常为10-15分钟），利用酶解作用使内皮细胞从基底膜上松动脱落。

4. 收集与培养：收集含细胞的消化液，离心去除酶液。将细胞重悬于含生长因子（如ECGF、VEGF）的内皮细胞专用培养基中，接种于包被了明胶或纤连蛋白的培养瓶中进行原代培养。

3. 严格的质量控制（QC）标准

我们深知原代细胞的质量直接决定实验成败，因此每批次HUVEC出厂前均需通过多重检测：

• 形态学观察： 镜下呈现典型的铺路石状（Cobblestone-like）或多角形镶嵌排列，边界清晰，核仁明显。

• 免疫表型鉴定（Flow Cytometry/ICC）：

• 阳性指标： CD31 (PECAM-1) > 95%、vWF (Von Willebrand Factor) 阳性。

• 阴性指标： α-SMA (平滑肌肌动蛋白) 阴性，排除血管平滑肌细胞污染。

• 细胞活性与代次： 提供P0-P2代细胞，复苏存活率 > 90%。

• 安全性检测： 细菌、真菌、支原体检测阴性；HIV-1/2、HBV、HCV、梅毒等病原体检测阴性。

4. 服务类型与定制选项

• 单供体（Single Donor）HUVEC： 来自单一脐带，适合研究个体差异或进行基因组学分析。

• 混合供体（Pooled Donors）HUVEC： 混合了3-5根不同脐带的细胞，最大限度消除个体差异，实验数据更具普适性和代表性，适合药物筛选。

• 增值服务：

• 管腔形成实验（Tube Formation Assay）： 验证HUVEC在Matrigel上的成管能力。

• 细胞因子刺激模型： 如TNF-α诱导的炎性损伤模型。

5. 核心应用领域

我们的HUVEC产品广泛服务于以下研究方向：

1. 血管生成（Angiogenesis）： 研究肿瘤血管新生机制，筛选抗血管生成药物（如VEGF抑制剂）。

2. 炎症与粘附： 模拟血管内皮炎症反应，研究白细胞与内皮细胞的粘附机制（ICAM-1/VCAM-1表达）。

3. 血管屏障功能： 构建体外血脑屏障（BBB）共培养模型或进行通透性实验。

4. 凝血与血栓： 研究内皮细胞在凝血级联反应和血栓形成中的调节作用。

5. 生物材料相容性： 评估血管支架、人工血管材料的内皮化能力。

6. 服务优势

• 合规稳定： 拥有稳定的临床样本来源渠道，严格遵循医学伦理。

• 纯度保障： 采用温和消化工艺，有效避免成纤维细胞和平滑肌细胞混入，纯度高达98%。

• 配套齐全： 提供配套的低血清内皮培养基系统（含生长因子添加剂），确保细胞生长状态。

• 全程技术支持： 提供细胞复苏、传代及下游功能实验的操作指南与疑难解答。

结语：
无论是基础机制探索还是转化医学研究，我们提供的高品质HUVEC都是您血管生物学实验的坚实基石。

注：本服务提供的细胞仅供科学研究使用，不可用于临床治疗。