SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)技术手册

1. 产品概述

SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液 (5×, Reducing Protein Loading Buffer) 是一种经过高度浓缩的常规蛋白电泳专用预混液。本产品含有高浓度的还原剂（如 DTT 或 β-巯基乙醇），专门用于在电泳前破坏蛋白质的二硫键并使其变性。

本产品由高纯度 SDS、甘油、溴酚蓝、Tris-HCl 缓冲系统及强效还原剂精确配制而成。5 倍浓缩的设计能够最大限度减少上样缓冲液的体积占比，从而允许加载更高容量的蛋白样品，显著提高低丰度蛋白的检测灵敏度。

2. 作用机理

本产品通过多重效应确保蛋白质按分子量大小精确分离：

• 变性与还原： 组分中的还原剂高效打开蛋白质分子内部及分子间的二硫键；SDS 与热处理协同作用，破坏蛋白质的二级、三级结构，使其展开成线性肽链并带上等密度的负电荷。

• 增加样品密度： 甘油 赋予样品较高的比重，使其能够稳定沉降于加样孔底部，防止样品溢出或扩散至电泳缓冲液中。

• 指示前沿： 溴酚蓝 作为灵敏的电泳指示剂，其迁移速率通常快于绝大多数蛋白质，便于实验人员实时监控电泳进度。

• pH 稳定： Tris-HCl 缓冲系统将样品 pH 稳定在 6.8 左右，与浓缩胶环境一致，确保蛋白质进入分离胶前被压缩成窄带。

3. 产品核心优势

• 还原能力强： 含有足量的还原组分，确保即便对于富含二硫键的复杂蛋白样本，也能实现线性化分离。

• 高浓缩、高载量： 5× 设计可腾出更多加样体积，是稀释样本或低表达蛋白检测的理想选择。

• 条带锐利清晰： 选用电泳级超纯原料，有效避免由于杂质导致的条带弥散、拖尾或非特异性污染。

• 即开即用： 省去繁琐的组分配称和 pH 调节过程，显著降低实验间的操作误差，提升数据重复性。

• 广泛兼容： 适配于各类商业预制胶及实验室自制凝胶体系。

4. 广泛的应用领域

• 常规 SDS-PAGE： 蛋白质样本的分子量鉴定、纯度分析。

• Western Blot： 免疫印迹前的样本变性处理。

• 蛋白质组学： 复杂组织裂解液、细胞提取物的电泳分离。

• 抗体结构研究： 还原条件下分析抗体的重链（~50 kDa）与轻链（~25 kDa）。

5. 技术参数规格 (Specifications)

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6. 使用方法

1. 混合： 取 1 体积本产品与 4 体积蛋白质样本混合（例如：40 μL 样本加入 10 μL 上样缓冲液）。

2. 变性： 充分混匀后，置于 95°C - 100°C 沸水浴或金属浴加热 5-10 分钟。

3. 瞬离： 冷却至室温后，短时间离心数秒，收集管盖上的冷凝液。

4. 上样： 直接取适量混合液加入电泳凝胶孔中进行电泳。

7. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)注意事项与质量承诺

• 安全提示： 本产品含有还原剂（具有特殊气味），操作时请在通风环境中进行，并佩戴手套。

• 沉淀处理： 若在低温保存下出现 SDS 析出，请室温放置或温水浴轻微加热溶解后使用。

• 质量承诺： 每一批次产品均经过标准蛋白电泳验证。我们承诺：本产品还原、背景洁净、条带分辨率高，为您的蛋白研究提供优秀数据表现。