DNA上样缓冲液（6×）技术手册

1. 产品概述

DNA 上样缓冲液 (6× DNA Loading Buffer) 是一种用于常规 DNA 电泳（琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶）的预混指示剂。本产品采用 6 倍浓缩设计，仅需微量添加即可为 DNA 样本提供理想的电泳性能。

本产品包含高浓度的密度梯度剂（如甘油或 Ficoll）、双色示踪染料（溴酚蓝与二甲苯青）以及金属离子螯合剂 EDTA。它旨在确保 DNA 样本能够稳定沉入加样孔底，并提供两条清晰的可见电泳前沿线，便于实验人员实时监控不同大小片段的迁移进度。

2. 作用机理

DNA 上样缓冲液通过以下多种功能确保电泳实验的成功：

• 增加密度： 组分中的高浓度密度试剂（甘油或 Ficoll 400）显著增加了样品的比重，使其能够垂直沉入加样孔底部，防止样本飘散至电泳缓冲液中导致损失。

• 双色示踪：

• 二甲苯青 FF (Xylene Cyanol FF)： 在 1% 琼脂糖凝胶中约位于 4000 bp 位置，用于示踪大片段。

• 溴酚蓝 (Bromophenol Blue)： 在 1% 琼脂糖凝胶中约位于 400-500 bp 位置，用于示踪小片段。

• 保护 DNA： 组分中的 EDTA 能够有效螯合环境中的mg等二价阳离子，从而抑制依赖于这些离子的核酸内切酶活性，防止 DNA 在电泳过程中被降解。

  
  

• 维持 pH： Tris-HCl 缓冲体系确保样品在进入凝胶初期维持稳定的电中性或弱碱性环境。

  
  

3. 产品核心优势

• 高浓缩倍数： 6× 设计允许用户添加更少量的缓冲液（仅占总体积的 1/6），从而提高上样孔中实际 DNA 的负载量，增强微量条带的可视性。

• 条带清晰锐利： 采用高纯度原料，不含核酸酶污染，有效消除条带弥散或拖尾现象，确保成像结果背景洁净。

• 指示前沿明确： 示踪染料在紫外激发下不产生荧光背景，不干扰 DNA 与荧光染料（如 EB, GoldView, Sybr Green）的结合及观察。

• 即开即用： 省去繁琐的配称步骤，显著提高实验效率，且批次间稳定性高，数据重复性好。

• 稳定性： 室温下性质稳定，4°C 可长期存放，不易发生沉淀或变质。

4. 广泛的应用领域

• PCR 产物检测： 快速鉴定 PCR 扩增片段的大小与特异性。

• 质粒 DNA 鉴定： 监测质粒的酶切消化、构象分析（超螺旋/开环）。

• 基因组 DNA 分析： 观察基因组 DNA 的完整性及其降解情况。

• DNA 胶回收： 在核酸回收过程中作为安全、清晰的追踪指示。

5. 技术参数规格 (Specifications)

6. 使用说明

1. 比例： 按照 1:5 的比例将 6× DNA Loading Buffer 加入到 DNA 样本中。例如：将 1 μL 缓冲液加入到 5 μL DNA 样本中。

2. 混匀： 用加样枪轻轻吹吸或轻轻微吸混匀。

3. 上样： 直接加样至电泳凝胶孔中。

4. 电泳： 根据凝胶浓度，观察溴酚蓝和二甲苯青的迁移位置，并在示踪染料到达凝胶下沿前 1-2 cm 处停止电泳。

7. DNA上样缓冲液（6×）质量承诺

我们对每一批次的 DNA 上样缓冲液均进行严格的无核酸酶污染测试及实际电泳条带迁移验证。我们承诺：本产品无荧光背景干扰、迁移速度恒定、对 DNA 保护性强，能为您提供电泳视觉体验和精准的数据支持。如有疑问，我们将为您提供专业解答。