巨核细胞(MK)是血小板的前体细胞，巨核细胞诱导分化对血小板短缺问题具有重大意义。然而，传统分化方案效率低、周期长、个体差异大，亟需建立高通量筛选平台以加速优化进程。该平台通常整合多能干细胞(iPSC或ESC)作为起始材料，通过自动化液体处理系统进行96或384孔板规模的因子/小分子组合测试。关键读出指标包括：CD41⁺/CD42b⁺双阳性率(流式)、多倍体核比例(DAPI染色)、proplatelet形成能力(显微成像)及释放血小板的功能验证。为提升通量，研究者开发了荧光报...

重组人骨形态发生蛋白-4(rhBMP-4)在骨组织再生修复、干细胞分化、疾病机制研究与治疗、心脑血管疾病研究、肿瘤研究等多个方面有应用。重组人骨形态发生蛋白-4具体介绍如下：骨组织再生修复：rhBMP-4具有强大的促成骨和成软骨活性，能够诱导未分化间充质细胞定向分化为成骨细胞，并合成胶原、形成钙化骨组织。在骨科和牙科再生医学中，rhBMP-4被广泛研究用于促进骨折愈合、脊柱融合和骨缺损修复。例如，动物模型研究表明，局部应用rhBMP-4重组蛋白可以加速骨折愈合过程，缩短骨痂形...

重组人干细胞因子(rhSCF)是支持造血干细胞体外扩增的核心细胞因子，其产量与质量直接决定下游应用成本与效果。中国仓鼠卵巢(CHO)细胞因其人源化翻译后修饰能力，成为rhSCF生产的常选宿主。高效表达细胞株的构建与筛选是工艺开发的关键第一步。构建策略通常包括：选择强启动子(如CMV或EF-1α)、优化信号肽序列以促进分泌、引入抗凋亡基因(如Bcl-2)延长培养周期，并通过转座子系统(如SleepingBeauty)或定点整合技术实现稳定高拷贝插入。随后，采用有限稀释法或FAC...

实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR，qPCR)是一种在DNA扩增反应中，通过荧光化学物质实时监测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的技术，可对特定核酸序列进行定量分析。一、检测原理实时荧光定量PCR结合了PCR技术和实时荧光检测技术，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化实时监测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化。通过Ct值(扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数)和标准曲线的分析，对起始模板进行定...

MK培养基(巨核细胞专用培养基)通常含有多种蛋白质类生长因子(如TPO、SCF)、维生素、脂质及缓冲体系，其生物活性易受温度、光照、氧化及微生物污染影响。如何在储存过程中较大限度保持其功能稳定性，是实验室与产业化应用中的关键问题。主要降解机制包括：蛋白质变性：TPO等细胞因子在4℃长期存放易聚集失活；反复冻融加速构象改变。氧化损伤：培养基中不饱和脂肪酸和还原性物质(如谷胱甘肽)易被氧化，产生自由基损害因子活性。pH漂移：碳酸氢盐缓冲体系在开盖后易受空气中CO₂影响，导致pH升...

流式分析的应用-细胞群比例测定测定某细胞群体或者亚群的比例是流式细胞术最基本的应用，完成细胞群比例测定需要解决以下两个问题。问题1：明确总体是什么，若要测定CD4T细胞的比例，就首先要明确这个比例是相对于哪一个总体而言的，是占所有T细胞的比例还是占所有淋巴细胞的比例，总体是根据实验具体要求决定的；问题2：明确这个细胞群体的特征表型（相对于总体细胞有什么特点），一般来说就是明确这个细胞群体相对于总体内的其他细胞具有或者缺少哪个特征性的抗原，利用该抗原的相应荧光素偶联抗体，就可以...